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探针法荧光定量PCR试剂盒中qPCR探针法采用的几种方式

发布时间:2021-03-04 点击量:103
  探针法荧光定量PCR试剂盒是使用探针法进行qPCR实验的 即用型优化预混液。兼容所有的qPCR检测仪器,多种模板。探针法荧光定量PCR试剂盒使用时仅需加入模板、探针和引物即可进行实验。反应管中的荧光强度也是探针法检测PCR产物量的依据。
 
  探针法荧光定量PCR试剂盒qPCR探针法的几种方式:
 
  1、Taq-Man探针:Taq-Man探针法是经典的探针方法。
 
  2、双杂交探针:与Taq-Man法不同,双杂交探针的供体基团和受体基团分别在两条探针上,这两条探针都可以与扩增产物杂交,杂交位置不同但很接近,反应时两条探针一头一尾杂交于扩增产物上,杂交后两个基团距离在10nm以内,此时产生荧光共振能量转移现象,激发光下供体基团不发光,受体基团发光,检测受体基团的发光情况既可以确认扩增产物的情况。
 
  3、分子信标探针:分子信标探针采用的是在反应中增加荧光基团和淬灭基团距离的方法,和Taq-Man法不同,分子信标探针不是采用酶切的方式使荧光基团和淬灭基团分离,而是通过杂交的方式改变探针二级结构,增加两个基团的距离从而使荧光基团发光。
 
  4、蝎形探针:蝎形探针又叫蝎形引物,因形状类似蝎子而得名,其基本原理与分子信标探针十分类似,不同点在于,蝎形探针3’端带了PCR引物,反应中得到的产物与蝎形探针为一个分子,探针的杂交在分子内部,而不需要两个分子参与,从而使杂交反应更加迅速,高效。